№119, Лейкоцитарная формула (дифференцированный подсчет лейкоцитов, лейкоцитограмма, Differential White Blood Cell Count) с микроскопией мазка крови при наличии патологических сдвигов

Включает в себя определение общей концентрации лейкоцитов крови и процентного соотношения основных субпопуляций лейкоцитов. В результате автоматизированного подсчёта лейкоцитарной формулы гематологический анализатор выделяет 5 субпопуляций лейкоцитов: нейтрофилы, лимфоциты, моноциты, эозинофилы и базофилы, в большинстве случаев этой информации вполне достаточно.

В тех случаях, когда прибор выдаёт предупреждение о присутствии среди лейкоцитов каких-либо аномальных клеток, дополнительно производят просмотр окрашенного препарата крови под микроскопом. Если при микроскопии врач также обнаруживает аномальные клетки, то при подсчёте лейкоцитарной формулы им могут быть выделены дополнительные субпопуляции, например: атипичные мононуклеары, плазматические клетки, юные, миелоциты и др., раздельно указан процент палочкоядерных и сегментоядерных нейтрофилов.

Метод определения. Анализаторы SYSMEX: SYSMEX XS 800i, SYSMEX XT 2000i, SYSMEX XE 2100. Концентрация лейкоцитов – кондуктометрия с использованием метода гидродинамической фокусировки. Дифференцировка лейкоцитов на субпопуляции – проточная цитометрия с использованием полупроводникового лазера. В случае необходимости – световая микроскопия.

Обращаем внимание, что при выполнении клинического анализа крови (№1515) и подсчете лейкоцитарной формулы (№119), если в пробах выявлены значимые отклонения и результат требует проведения ручной микроскопии, ИНВИТРО дополнительно бесплатно проводит ручной подсчет лейкоцитарной формулы с подсчетом молодых форм нейтрофилов (в том числе точным подсчетом палочкоядерных нейтрофилов) и количественной оценкой всех патологических форм лейкоцитов (при их наличии).

Накануне исследования необходимо исключить повышенные психоэмоциональные и физические нагрузки (спортивные тренировки), приём алкоголя.

Показания к назначению подсчёта лейкоцитарной формулы:

• плановое профилактическое обследование;
  
• обследование перед госпитализацией;
  
• диагностика инфекционных, воспалительных и гематологических заболеваний;
• мониторинг эффективности проводимой терапии или течения заболевания.

Концентрация лейкоцитов (WBC, White Blood Cells). Клетки с ядрами, обеспечивающие выполнение функции защиты. Образуются в красном костном мозге и органах лимфатической системы. Функции и время жизни зависят от того, к какой популяции (нейтрофилы, лимфоциты, моноциты, эозинофилы или базофилы) относится лейкоцит.

Метод определения: кондуктометрия с использованием метода гидродинамической фокусировки. Единицы измерения в Независимой лаборатории ИНВИТРО: тыс/мкл (10³ клеток/мкл).
Альтернативные единицы измерения: 10⁹ клеток /л.
Коэффициенты пересчёта: 10⁹ клеток/л = 10³ клеток/мкл = тыс/мкл.

Референсные значения:

Возраст	Концентрация лейкоцитов тыс/мкл (103 клеток/мкл)
1 день - 12 месяцев	6,0 - 17,5
12 месяцев -2 года	6,0 - 17,0
2 года - 4 года	5,5 - 15,5
4 года - 6 лет	5,0 - 14,5
6 лет - 10 лет	4,50 - 13,5
10 лет - 16 лет	4,50 - 13,0
16 лет - 120 лет	4,50 - 11,0

Понижение значений:

1. вирусные и некоторые хронические инфекции;
   
2. приём лекарственных препаратов (антибиотики, цитостатики, нестероидные противовоспалительные средства, тиреостатики и др.);
3. аутоиммунные заболевания;
   
4. воздействие ионизирующего излучения;
   
5. истощение и кахексия;
   
6. анемии;
   
7. спленомегалия;
   
8. гемобластозы.

Различные виды лейкоцитов выполняют разные функции, поэтому при отклонении количества лейкоцитов в ту или другую сторону от референсных значений, наиболее важным является то, какая (или какие) из субпопуляций лейкоцитов ответственна за это отклонение. Однако следует принимать во внимание и то, что изменения лейкоцитарной формулы не являются специфичными - они могут иметь сходный характер при разных заболеваниях, или, напротив, могут встречаться непохожие изменения при одной и той же патологии у разных больных.

Лейкоцитарная формула имеет возрастные особенности, поэтому её сдвиги должны оцениваться с позиции возрастной нормы (это особенно важно при обследовании детей). При интерпретации результатов также следует помнить, что повышение или понижение может быть как абсолютным (меняется именно количество лейкоцитов, относящихся к данной популяции), так и относительным (меняется процентное соотношение клеток в лейкоцитарной формуле из-за изменения количества клеток, относящихся к другим субпопуляциям).

Для того, чтобы получить представление об абсолютном количестве клеток, относящихся к какой-либо субпопуляции, необходимо произвести расчёт, исходя из процентного содержания клеток данной субпопуляции и общей концентрации лейкоцитов (например, при общей концентрации лейкоцитов – 10 тыс/мкл и относительном содержании нейтрофилов - 60%, абсолютное количество нейтрофилов составит 6 тыс/мкл).

Нейтрофилы (общее число). Клетки с сегментированным ядром и нейтрофильными гранулами в цитоплазме. Основная их функция – защита от бактериальных инфекций, а именно – распознавание, захват и уничтожение бактерий. Среднее время жизни - 15 суток, большую часть из них нейтрофилы проводят в костном мозге, по выходе из него в кровеносном русле – 8-10 часов, после чего поступают в периферические ткани.

Примерно половина нейтрофилов, находящихся в кровеносном русле, обратимо прилипает к эндотелиальным клеткам внутренней поверхности кровеносного сосуда (пристеночный пул). При стимуляции (контакт с инфекционным агентом, стресс, физическая нагрузка, гипоксия и др.) концентрация нейтрофилов в кровеносном русле может резко возрастать за счёт ускорения выхода нейтрофилов из костного мозга, а также за счёт мобилизации пристеночного пула, поэтому количество нейтрофилов может значительно изменяться даже в течение нескольких часов.

Нейтрофилией (значимым повышением количества нейтрофилов) считают повышение абсолютного количества нейтрофилов более 7,5 тысяч в микролитре, нейтропенией (значимым снижением абсолютного количества нейтрофилов) считается снижение абсолютного количества ниже 1,8 тысячи в микролитре. Снижение абсолютного количества нейтрофилов менее 500 в микролитре может вести к существенным сбоям в иммунной защите организма.

Метод определения: проточная цитометрия с использованием полупроводникового лазера.
Единицы измерения в Независимой лаборатории ИНВИТРО: %.

Референсные значения:

Возраст	Процентное соотношение нейтрофилов (%)
1 день – 15 дней	31,0 – 56,0
15 дней – 12 месяцев	17,0 – 51,0
12 месяцев – 2 года	29,0 – 54,0
2 года – 5 лет	33,0 – 61,0
5 лет – 7 лет	39,0 – 64,0
7 лет – 9 лет	42,0 – 66,0
9 лет – 11 лет	44,0 – 66,0
11 лет – 15 лет	46,0 – 66,0
15 лет >	48,0 – 78,0

Повышение значений:

1. большинство заболеваний, вызванных бактериальными инфекциями;
   
2. воспалительные процессы;
   
3. стресс;
   
4. физическое перенапряжение;
   
5. инфаркты внутренних органов;
   
6. состояния после перенесённых оперативных вмешательств;
   
7. приём лекарственных препаратов (кортикостероиды, гепарин, ацетилхолин);
   
8. эндогенные интоксикации;
   
9. злокачественные новообразования.

Понижение значений:

1. некоторые инфекции, вызванные бактериями (брюшной тиф и паратифы, бруцеллёз, туберкулёз), вирусами (грипп, корь, ветряная оспа, вирусный гепатит, краснуха), простейшими (малярия), риккетсиями (сыпной тиф), затяжные инфекции у пожилых и ослабленных людей.;
2. приём лекарственных препаратов (антибиотики, противовирусные, психотропные, антигистаминные, противосудорожные препараты, нестероидные противоспалительные средства);
   
3. анемии;
   
4. гиперспленизм;
   
5. врождённые нейтропении;
   
6. анафилактический шок;
   
7. тиреотоксикоз;
8. воздействие цитостатиков, противоопухолевых препаратов.

Лимфоциты. Небольшие клетки с несегментированным округлым ядром. Продолжительность жизни – от нескольких дней до нескольких лет, в зависимости от выполняемых функций. В их числе: распознавание различных антигенов благодаря экспрессии на поверхности клеток уникальных антигенных рецепторов, формирование гуморального иммунного ответа путём синтеза антител к чужеродным белкам (иммуноглобулинов различных классов), обеспечение клеточного иммунитета - уничтожения разных клеток непосредственно эффекторными цитотоксическими лимфоцитами (отторжение трансплантата, противоопухолевый иммунитет, иммунитет против внутриклеточных паразитов, в том числе противовирусный). Часть лимфоцитов является клетками памяти, которые сохраняют информацию о ранее встречавшемся антигене. Они быстро пролиферируют и продуцируют большие количества антител при повторной встрече с известным антигеном.

Лимфоциты обладают способностью синтезировать и секретировать в кровь различные белковые регуляторы - цитокины, посредством которых осуществляют координацию и регуляцию иммунного ответа.

Лимфоцитозом (значимым повышением количества лифоцитов) считается повышение абсолютного количества лимфоцитов более 5 тысяч в микролитре, лимфопенией (значимым снижением абсолютного количества лимфоцитов) считается снижение абсолютного количества менее 1 тысячи в микролитре.

Метод определения: проточная цитометрия с использованием полупроводникового лазера.
Единицы измерения в Независимой лаборатории ИНВИТРО: %

Референсные значения:

Возраст	Процентное содержание лимфоцитов (%)
1 день – 15 дней	22,0 – 55,0
15 дней – 12 месяцев	45,0 – 70,0
12 месяцев – 2 года	37,0 – 60,0
2 года – 5 лет	33,0 – 55,0
5 лет – 9 лет	30,0 – 50,0
9 лет – 12 лет	30,0 – 46,0
12 лет – 15 лет	30,0 – 45,0
15 лет – 120 лет	19,0 – 37,0

Повышение значений:

1. большинство заболеваний, вызванных вирусными инфекциями;
   
2. действие некоторых лекарственных препаратов - леводопа, фенитоина, вальпроевой кислоты, наркотических анальгетиков и др.;
3. заболевания системы крови: хронический лимфолейкоз; лимфомы в период лейкемизации, болезнь тяжелых цепей;
4. отравление тетрахлорэтаном, свинцом, мышьяком, дисульфидом углерода.

Понижение значений:

1. острый период воспалительных заболеваний;
   
2. приём лекарственных препаратов (глюкокортикоиды, цитостатики);
   
3. апластическая анемия;
   
4. иммунодефицитные состояния;
   
5. почечная недостаточность;
   
6. потеря лимфы через кишечник;
   
7. системная красная волчанка;
   
8. воздействие рентгеновского облучения;
   
9. терминальная стадия онкологических заболеваний;
   
10. милиарный туберкулёз;
    
11. лимфогранулематоз.

Моноциты. Крупные клетки с несегментированным бобовидным ядром. Продолжительность жизни в кровотоке – около суток, после чего моноцит переходит в ткани, где дифференцирует в тканеспецифичный макрофаг. Время жизни этих клеток может достигать нескольких лет.

Выполняют функции, сходные с функциями гранулоцитов, а именно – распознавание, захват и уничтожение бактерий и грибов, однако их фагоцитарная активность выше. В очаге воспаления макрофаги фагоцитируют микроорганизмы, а также погибшие лейкоциты, повреждённые клетки воспалённой ткани, очищая очаг воспаления и подготавливая его для регенерации. Макрофаги более эффективны, чем нейтрофилы в фагоцитозе микобактерий, грибков и макромолекул.

Моноцитозом (значимым повышением количества моноцитов) считается повышение абсолютного количества моноцитов более 1000 в микролитре.

Метод определения: проточная цитометрия с использованием полупроводникового лазера.
Единицы измерения в Независимой лаборатории ИНВИТРО: %.

Референсные значения:

Возраст	Процентное содержание моноцитов (%)
от 1 до 15 дней	5 - 15
от 15 дней до 12 мес.	4 - 10
12 месяцев - 2 года	3 - 10
2 года - 15 лет	3 - 9
от 15 лет и старше	3 - 11

Интерпретация результата

Повышение значений:

1. острые и хронические инфекционные и воспалительные процессы;
   
2. состояния после перенесённого инфекционного заболевания;
   
3. аутоиммунные заболевания;
   
4. злокачественные новообразования;
5. онкогематологические заболевания;
   
6. отравление тетрахлорэтаном, фосфором.

Понижение значений:

1. приём лекарственных препаратов (глюкокортикоиды, цитостатики);
   
2. пиогенные инфекции;
   
3. апластическая анемия;
4. шоковые состояния;
   
5. онкогематологические заболевания.

Эозинофилы. Клетки с сегментированным ядром и заполненной однородными гранулами цитоплазмой. Подобно нейтрофилам, способны к хемотаксису и фагоцитозу, однако, основная их роль – борьба с паразитами и контроль аллергических реакций. В циркулирующей крови находятся не более часа, после чего поступают в ткани.

Эозинофилией (значимым повышением количества эозинофилов) считается повышение их абсолютного количества более 700 в микролитре. В том случае, когда абсолютное количество эозинофилов стабильно сохраняется не менее 1500 в микролитре на протяжении длительного времени, возможно возникновение поражения внутренних органов, вызванного эозинофильной инфильтрацией и воздействием токсических продуктов кислорода и гранулярных белков. Эозинопенией (значимым снижением количества эозинофилов) считается снижение их абсолютного числа менее 200 в микролитре.

Метод определения: проточная цитометрия с использованием полупроводникового лазера.
Единицы измерения в Независимой лаборатории ИНВИТРО: %.

Референсные значения:

Возраст	Процентное содержание эозинофилов (%)
1 день – 15 дней	1,0 – 6,0
15 дней – 12 месяцев	1,0 – 5,0
12 месяцев – 2 года	1,0 – 7,0
2 года – 5 лет	1,0 – 6,0
5 лет – 120 лет	1,0 – 5,0

Интерпретация результата
 
Повышение значений:

1. аллергические состояния, в том числе и лекарственные аллергии;
   
2. заболевания кожи (дерматит, экзема);
3. паразитарные инвазии;
   
4. острый период некоторых инфекционных заболеваний (скарлатина, ветряная оспа, туберкулёз инфекционный мононуклеоз, гонорея);
   
5. системные воспалительные заболевания;
   
6. заболевания лёгких - саркоидоз, легочная эозинофильная пневмония, гистиоцитоз из клеток Лангерганса, эозинофильный плеврит, лёгочный эозинофильный инфильтрат (болезнь Лефлера);
7. онкогематологические заболевания;
8. злокачественные новообразования.

Понижение значений:

1. начальная стадия воспалительного процесса;
   
2. тяжелые гнойные инфекции;
   
3. шоковые состояния;
   
4. отравления тяжёлыми металлами.

Базофилы. Клетки с сегментированным ядром и крупными, разнородными по размеру и форме, гранулами в цитоплазме. Время нахождения в кровотоке – 2,5 дня. Основная их функция – участие в аллергических реакциях различного типа.

Базофилией (значимым повышением количества базофилов) считается повышение их абсолютного количества более 150 в микролитре.

Метод определения: проточная цитометрия с использованием полупроводникового лазера.
Единицы измерения в Независимой лаборатории ИНВИТРО: %.

Референсные значения: 0 - 120 лет: < 1,0 (процентное содержание базофилов).

Интерпретация результата

Повышение значений:

1. аллергические состояния, в том числе и лекарственные аллергии; 
2. язвенный колит;
   
3. хронические гемолитические анемии;
   
4. некоторые инфекционные заболевания (грипп, ветряная оспа, туберкулёз);
   
5. злокачественные новообразования;
   
6. онкогематологические заболевания.
   

Дополнительные субпопуляции клеток:

1. Атипичные мононуклеары – клетки лимфоидной природы, с разнообразной морфологией. Возникают в ответ на вирусные инфекции, чаще всего – на инфицирование вирусом Эпштейн-Барра (инфекционный мононуклеоз), но могут присутствовать и при других вирусных заболеваниях.
   
2. Плазматические клетки – антителообразующие клетки лимфоидной природы. Обычно находятся в лимфатических узлах и селезёнке. Могут появляться в кровотоке при инфекционных заболеваниях. Присутствие 1-2% плазматических клеток можно считать вариантом нормы. Присутствие большого количества плазматических клеток (более 10%) характерно для ряда онкогематологических заболеваний.
   
3. Палочкоядерные нейтрофилы – «молодые» нейтрофилы, с несегментированным ядром. В норме их количество составляет от 1 до 6% от общего количества лейкоцитов. Повышение содержания палочкоядерных нейтрофилов обычно говорит о присутствии инфекционного или воспалительного процесса.
   
4. Юные, миелоциты – незрелые клетки гранулоцитарного ряда, предшественники палочкоядерных нейтрофилов. Их присутствие также может говорить о наличии инфекционного или воспалительного процесса. Могут появляться и при приёме некоторых лекарственных препаратов. Как вариант нормы в небольшом количестве могут присутствовать у беременных женщин и новорождённых детей. Присутствие значительного количества незрелых гранулоцитов, в сочетании с бластами, характерно для ряда онкогематологических заболеваний.
   
5. Бласты – незрелые недифференцированные клетки. В норме в кровотоке не встречаются. Их присутствие характерно для онкогематологических заболеваний.