Исследуемый материал
Соскоб эпителиальных клеток урогенитальный
Метод определения
ПЦР с детекцией в режиме «реального времени».
Количественное определение ДНК Lactobacillus spp. в соскобе эпителиальных клеток урогенитального тракта методом полимеразной цепной реакции (ПЦР) с детекцией в режиме «реального времени».
В настоящее время известно более 150 видов лактобацилл. В различных биотопах человека обитает около полутора-двух десятков видов. У женщин репродуктивного возраста нормофлора влагалища представлена преимущественно 5-6 видами Lactobacillus spp., которые составляют основу микробиоценоза. Данное исследование выявляет L. iners, L. crispatus, L. jensenii и L. gasseri - основные виды лактобактерий, колонизирующие влагалище, а также L. acidophilus, L. reuteri, L. delbrueckii, L. helveticus, L. fermentum, L. bulgaricus, L. casei, L. paracasei, L. rhamnosus, L. salivarius и L. johnsonii, применяемые в качестве пробиотиков.
Абсолютное количество лактобацилл может колебаться в достаточно широких пределах и требует количественной оценки. По данным разных авторов количество лактобацилл во влагалище здоровой женщины варьирует от 10^5 до 10^9 КОЕ/мл, что составляет от 90 до 99,9% всей микрофлоры влагалища.
Лактобактерии оказывают существенное влияние на процессы обмена веществ, обеспечивают организм человека витаминами группы В, С, К, никотиновой и фолиевой кислотами, биотином, вырабатывают аминокислоты, молочную, уксусную и другие органические кислоты, антибиотико- и гормоноподобные вещества, перекись водорода, L. fermentum № 90T-C4 продуцирует эндогенный лизоцим.
Выраженный дисбиоз влагалища – состояние микробиоценоза, характеризующееся значительным снижением доли лактобактерий (менее 20% от всех выделенных микроорганизмов) или полных их отсутствием. Выявление низкого содержания лактобактерий само по себе не является основанием для заключения о наличии какого-либо заболевания, ассоциированного с нарушением состава микрофлоры, однако указывает на его высокую вероятность и требует подтверждения, основанного на результатах анализа клинических данных и/или выявления условно-патогенных бактерий в концентрации, имеющей диагностическую значимость.
Аналитические показатели:
Определяемый фрагмент - специфичный участок ДНК Lactobacillus spp.
Специфичность определения –100%.
Чувствительность определения - 100 копий ДНК Lactobacillus spp. в образце.
В тесте также проводится определение содержания общей бактериальной массы (ОБМ) и контроля взятия материала (КВМ)- тест на содержание ДНК гена HMBS человека.
Литература
- Видовой состав вагинальных лактобактерий у женщин репродуктивного возраста с выраженным дисбиозом влагалища-. Ворошилина Е.С., Зорников Д.Л. стр. 179, Молекулярная диагностика 2014 том 1, стр. 179.
- Набор реагентов "РеалБест ЛактоНорм" для определения доли ДНК лактобактерий в суммарной бактериальной ДНК методом мультиплексной ПЦР с детекцией в режиме реального времени.- Н.В. Фоменко, Ю.В. Хворостова, С.А. Глушков, М.К. Иванов, НВБ 3(69) 2013