№486/479, Раздельное определение токсина А и токсина В Clostridium difficile в кале, антигенный тест (Toxin A and B Clostridium difficile. One step rapid immunосhromotographic assay)

Clostridium difficile (C. difficile) – анаэробная грамположительная палочка, является основным этиологическим фактором антибиотико-ассоциированной диареи и псевдомембранозного колита. Колонизация кишечника C. difficile характерна для 2% здорового взрослого населения и до 50% детей младше 2 лет, присутствуя как часть обычной флоры. Но иногда, на фоне лечения других инфекций антибиотиками широкого спектра, баланс микрофлоры нарушается. Более чувствительная нормальная флора элиминируется антибиотиками, а резистентная к ним C. difficile показывает усиленный рост. Угнетение нормальной флоры и размножение условно-патогенных микроорганизмов может приводить к развитию диареи и/или нарушению целостности кишечного эпителия и воспалению. 

C. difficile продуцирует, как минимум, три фактора, потенциально патогенных для человека. Токсины А и B считаются наиболее важными факторами патогенеза заболеваний, связанных с C. difficile. Токсин А представляет собой энтеротоксин, который влияет на цитоскелет клеток эпителия кишечника, вызывая их дисфункцию. Токсин В – это цитотоксин с выраженным цитопатологическим эффектом. 

Не все штаммы C. difficile продуцируют токсины. Большинство патогенных штаммов продуцируют оба токсина, но есть сообщения о патогенных штаммах C. difficile, продуцирующих только токсин B. Таким образом, выявление токсина А и В в кале больных с диареей имеет большую диагностическую значимость по сравнению с выделением культур бактерий. По рекомендациям профессиональных медицинских сообществ при диагностике клостридиоза следует использовать тест-системы для одновременного определения токсинов А и В (суммарное или раздельное определение) C. difficile в кале, что позволяет не пропустить инфицирование штаммами бактерий, продуцирующих только токсин В.

1. Шелыгин Ю. А. и соавт. Клинические рекомендации Национальной ассоциации специалистов по контролю инфекций, связанных с оказанием медицинской помощи и общероссийской общественной некоммерческой организации «ассоциации колопроктологов России» по диагностике, лечению и профилактике Clostridium difficile-ассоциированной диареи (CDI). 2017. http://www.gnck.ru/rec/recommendation_clostridium_difficile.pdf, https://melitta-uv.ru/media/publications/ 
2. Козлов Р.С. и соавт. Обзор обновленных практических рекомендаций Американского общества по инфекционным болезням (IDSA) и Американского общества эпидемиологии здравоохранения (SHEA) по инфекциям, вызванным Clostridiumdifficile, у детей и взрослых. КМАХ .2018, Том 20. №2, стр. 76-124. http://www.antibiotic.ru/cmac/pdf/cmac.2018.t20.n2.p076.pdf 
3. Сухина М.А., Сафин А.Л. Современное состояние лабораторной диагностики Clostridium difficileассоциированных диарей; методы детекции токсигенных штаммов Clostridium difficile (Обзор литературы). Клиническая лабораторная диагностика. 2017; 62(10): 635-640. DOI: http://dx.doi.org/10.18821/0869-2084-2017-62-10-635-640 https://cyberleninka.ru/article/n/sovremennoe-sostoyanie-laboratornoy-diagnostiki-clostridium-difficile-assotsiirovannyh-diarey-metody-detektsii-toksigennyh-shtammov 
4. А.В. Шиповской, С.Б. Фадеев. Опыт применения иммуноферментного анализа для диагностики антибиотикоассоциированных диарей. Бюллетень Оренбургского научного центра УрО РАН (электронный журнал), 2013, №1, стр. 1-8. https://cyberleninka.ru/article/n/opyt-primeneniya-immunofermentnogo-analiza-dlya-diagnostiki-antibiotikoassotsiirovannyh-diarey 
5. Н.В. Дмитриева, И.А. Ключникова, И.И. Шильникова. Clostridium difficile-ассоциированная диарея (обзор литературы). Сибирский онкологический журнал, 2014. № 1 (61), стр. 46-53. https://cyberleninka.ru/article/v/clostridium-difficileassotsiirovannaya-diareya  
6. А.В. Щербакова, С.К. Аджигайтканова, Н.Г. Потешкина. Clostridium difficile-ассоциированный колит: обзор рекомендаций. Лечебное дело, №3, 2014, стр. 20-24. https://cyberleninka.ru/article/v/clostridium-difficile-assotsiirovannyy-kolit-obzor-rekomendatsiy 
7. Игорь Карпов и соавт. Clostridium difficile-ассоциированная инфекция. Медвестник, 2016. .http://www.medvestnik.by/ru/sovremennii_podxod/view/clostridium-difficile-assotsiirovannaja-infektsija-15999-2016/ 
8. Заплатников А.Л., Захарова И.Н., Коровина Н.А. Clostridium difficile-инфекция у детей. «РМЖ» №5 от 06.03.2004 стр.373. https://www.rmj.ru/articles/pediatriya/Clostridium_difficile-infekciya_u_detey/ 
9. LabTests Online. AACC. Clostridium difficile and C. diff Toxin Testing. https://labtestsonline.org/

• образцы кала должны быть получены как можно скорее после появления симптомов заболевания; 
• не принимается на исследование кал, присланный на тампоне или в транспортной среде; 
• не принимается материал, собранный в нестерильный или неплотно закрытый контейнер.

Транспортная среда:  

• Кал собирается в ККЛ в количестве 1/3 объема контейнера. 

Хранение и транспортировка: 

• материал, собранный в ККЛ, хранят не более 48 часов при температуре +2…+8°С;  
• допускается замораживание при -17…-23°С, срок хранения 1 (один) месяц. Повторное замораживание/размораживание не допустимо! Транспортировка осуществляется при температуре +2…+8°С.

1. Шелыгин Ю. А. и соавт. Клинические рекомендации Национальной ассоциации специалистов по контролю инфекций, связанных с оказанием медицинской помощи и общероссийской общественной некоммерческой организации «ассоциации колопроктологов России» по диагностике, лечению и профилактике Clostridium difficile-ассоциированной диареи (CDI). 2017. http://www.gnck.ru/rec/recommendation_clostridium_difficile.pdf, https://melitta-uv.ru/media/publications/ 
2. Козлов Р.С. и соавт. Обзор обновленных практических рекомендаций Американского общества по инфекционным болезням (IDSA) и Американского общества эпидемиологии здравоохранения (SHEA) по инфекциям, вызванным Clostridiumdifficile, у детей и взрослых. КМАХ .2018, Том 20. №2, стр. 76-124. http://www.antibiotic.ru/cmac/pdf/cmac.2018.t20.n2.p076.pdf 
3. Сухина М.А., Сафин А.Л. Современное состояние лабораторной диагностики Clostridium difficileассоциированных диарей; методы детекции токсигенных штаммов Clostridium difficile (Обзор литературы). Клиническая лабораторная диагностика. 2017; 62(10): 635-640. DOI: http://dx.doi.org/10.18821/0869-2084-2017-62-10-635-640 https://cyberleninka.ru/article/n/sovremennoe-sostoyanie-laboratornoy-diagnostiki-clostridium-difficile-assotsiirovannyh-diarey-metody-detektsii-toksigennyh-shtammov 
4. А.В. Шиповской, С.Б. Фадеев. Опыт применения иммуноферментного анализа для диагностики антибиотикоассоциированных диарей. Бюллетень Оренбургского научного центра УрО РАН (электронный журнал), 2013, №1, стр. 1-8. https://cyberleninka.ru/article/n/opyt-primeneniya-immunofermentnogo-analiza-dlya-diagnostiki-antibiotikoassotsiirovannyh-diarey 
5. Н.В. Дмитриева, И.А. Ключникова, И.И. Шильникова. Clostridium difficile-ассоциированная диарея (обзор литературы). Сибирский онкологический журнал, 2014. № 1 (61), стр. 46-53. https://cyberleninka.ru/article/v/clostridium-difficileassotsiirovannaya-diareya  
6. А.В. Щербакова, С.К. Аджигайтканова, Н.Г. Потешкина. Clostridium difficile-ассоциированный колит: обзор рекомендаций. Лечебное дело, №3, 2014, стр. 20-24. https://cyberleninka.ru/article/v/clostridium-difficile-assotsiirovannyy-kolit-obzor-rekomendatsiy 
7. Игорь Карпов и соавт. Clostridium difficile-ассоциированная инфекция. Медвестник, 2016. .http://www.medvestnik.by/ru/sovremennii_podxod/view/clostridium-difficile-assotsiirovannaja-infektsija-15999-2016/ 
8. Заплатников А.Л., Захарова И.Н., Коровина Н.А. Clostridium difficile-инфекция у детей. «РМЖ» №5 от 06.03.2004 стр.373. https://www.rmj.ru/articles/pediatriya/Clostridium_difficile-infekciya_u_detey/ 
9. LabTests Online. AACC. Clostridium difficile and C. diff Toxin Testing. https://labtestsonline.org/

• диарея, развившаяся на фоне приёма антибиотиков у стационарных больных; 
• амбулаторные пациенты с симптомами диареи в период 6-8 недель после приема антибиотиков, или нескольких дней после химиотерапии; 
• скрининговые исследования для постановки предварительного диагноза у пациентов с диареей при отсутствии других инфекционных или неинфекционных причин; 
• дифференциальная диагностика заболеваний, сопровождающихся диареей, судорогами, абдоминальными болями, лихорадкой, тошнотой, рвотой, поражением лимфоидной ткани и нервной системы.

1. Шелыгин Ю. А. и соавт. Клинические рекомендации Национальной ассоциации специалистов по контролю инфекций, связанных с оказанием медицинской помощи и общероссийской общественной некоммерческой организации «ассоциации колопроктологов России» по диагностике, лечению и профилактике Clostridium difficile-ассоциированной диареи (CDI). 2017. http://www.gnck.ru/rec/recommendation_clostridium_difficile.pdf, https://melitta-uv.ru/media/publications/ 
2. Козлов Р.С. и соавт. Обзор обновленных практических рекомендаций Американского общества по инфекционным болезням (IDSA) и Американского общества эпидемиологии здравоохранения (SHEA) по инфекциям, вызванным Clostridiumdifficile, у детей и взрослых. КМАХ .2018, Том 20. №2, стр. 76-124. http://www.antibiotic.ru/cmac/pdf/cmac.2018.t20.n2.p076.pdf 
3. Сухина М.А., Сафин А.Л. Современное состояние лабораторной диагностики Clostridium difficileассоциированных диарей; методы детекции токсигенных штаммов Clostridium difficile (Обзор литературы). Клиническая лабораторная диагностика. 2017; 62(10): 635-640. DOI: http://dx.doi.org/10.18821/0869-2084-2017-62-10-635-640 https://cyberleninka.ru/article/n/sovremennoe-sostoyanie-laboratornoy-diagnostiki-clostridium-difficile-assotsiirovannyh-diarey-metody-detektsii-toksigennyh-shtammov 
4. А.В. Шиповской, С.Б. Фадеев. Опыт применения иммуноферментного анализа для диагностики антибиотикоассоциированных диарей. Бюллетень Оренбургского научного центра УрО РАН (электронный журнал), 2013, №1, стр. 1-8. https://cyberleninka.ru/article/n/opyt-primeneniya-immunofermentnogo-analiza-dlya-diagnostiki-antibiotikoassotsiirovannyh-diarey 
5. Н.В. Дмитриева, И.А. Ключникова, И.И. Шильникова. Clostridium difficile-ассоциированная диарея (обзор литературы). Сибирский онкологический журнал, 2014. № 1 (61), стр. 46-53. https://cyberleninka.ru/article/v/clostridium-difficileassotsiirovannaya-diareya  
6. А.В. Щербакова, С.К. Аджигайтканова, Н.Г. Потешкина. Clostridium difficile-ассоциированный колит: обзор рекомендаций. Лечебное дело, №3, 2014, стр. 20-24. https://cyberleninka.ru/article/v/clostridium-difficile-assotsiirovannyy-kolit-obzor-rekomendatsiy 
7. Игорь Карпов и соавт. Clostridium difficile-ассоциированная инфекция. Медвестник, 2016. .http://www.medvestnik.by/ru/sovremennii_podxod/view/clostridium-difficile-assotsiirovannaja-infektsija-15999-2016/ 
8. Заплатников А.Л., Захарова И.Н., Коровина Н.А. Clostridium difficile-инфекция у детей. «РМЖ» №5 от 06.03.2004 стр.373. https://www.rmj.ru/articles/pediatriya/Clostridium_difficile-infekciya_u_detey/ 
9. LabTests Online. AACC. Clostridium difficile and C. diff Toxin Testing. https://labtestsonline.org/

Единицы измерения в ИНВИТРО: 

Нет. Тест качественный. 

Референсные значения: 

Токсин А: не обнаружено 

Токсин В: не обнаружено 

Интерпретация: 

При отсутствии токсина А и/или В выдается результат «не обнаружено». В случае обнаружения токсина А и/или В выдается результат «обнаружено». 

Положительный результат: свидетельствует об инфицированности или носительстве. Положительные результаты теста не исключают наличия других патогенов 

Отрицательный результат: не исключают наличия инфекции C. difficile и может быть вызван протеолизом токсинов в пробе при неправильном хранении. В этом случае обоснованного подозрения на инфекцию следует провести дополнительное исследование новой пробы. Отрицательные результаты также могут быть обусловлены прерывистым выделение токсинов или тем, что концентрация их слишком низкая и находится за пределами детекции (чувствительность теста 87,7%, специфичность - 91,7%). 

Как и в случае других диагностических тестов, полученные результаты должны подтверждаться с помощью других клинических и лабораторных данных

1. Шелыгин Ю. А. и соавт. Клинические рекомендации Национальной ассоциации специалистов по контролю инфекций, связанных с оказанием медицинской помощи и общероссийской общественной некоммерческой организации «ассоциации колопроктологов России» по диагностике, лечению и профилактике Clostridium difficile-ассоциированной диареи (CDI). 2017. http://www.gnck.ru/rec/recommendation_clostridium_difficile.pdf, https://melitta-uv.ru/media/publications/ 
2. Козлов Р.С. и соавт. Обзор обновленных практических рекомендаций Американского общества по инфекционным болезням (IDSA) и Американского общества эпидемиологии здравоохранения (SHEA) по инфекциям, вызванным Clostridiumdifficile, у детей и взрослых. КМАХ .2018, Том 20. №2, стр. 76-124. http://www.antibiotic.ru/cmac/pdf/cmac.2018.t20.n2.p076.pdf 
3. Сухина М.А., Сафин А.Л. Современное состояние лабораторной диагностики Clostridium difficileассоциированных диарей; методы детекции токсигенных штаммов Clostridium difficile (Обзор литературы). Клиническая лабораторная диагностика. 2017; 62(10): 635-640. DOI: http://dx.doi.org/10.18821/0869-2084-2017-62-10-635-640 https://cyberleninka.ru/article/n/sovremennoe-sostoyanie-laboratornoy-diagnostiki-clostridium-difficile-assotsiirovannyh-diarey-metody-detektsii-toksigennyh-shtammov 
4. А.В. Шиповской, С.Б. Фадеев. Опыт применения иммуноферментного анализа для диагностики антибиотикоассоциированных диарей. Бюллетень Оренбургского научного центра УрО РАН (электронный журнал), 2013, №1, стр. 1-8. https://cyberleninka.ru/article/n/opyt-primeneniya-immunofermentnogo-analiza-dlya-diagnostiki-antibiotikoassotsiirovannyh-diarey 
5. Н.В. Дмитриева, И.А. Ключникова, И.И. Шильникова. Clostridium difficile-ассоциированная диарея (обзор литературы). Сибирский онкологический журнал, 2014. № 1 (61), стр. 46-53. https://cyberleninka.ru/article/v/clostridium-difficileassotsiirovannaya-diareya  
6. А.В. Щербакова, С.К. Аджигайтканова, Н.Г. Потешкина. Clostridium difficile-ассоциированный колит: обзор рекомендаций. Лечебное дело, №3, 2014, стр. 20-24. https://cyberleninka.ru/article/v/clostridium-difficile-assotsiirovannyy-kolit-obzor-rekomendatsiy 
7. Игорь Карпов и соавт. Clostridium difficile-ассоциированная инфекция. Медвестник, 2016. .http://www.medvestnik.by/ru/sovremennii_podxod/view/clostridium-difficile-assotsiirovannaja-infektsija-15999-2016/ 
8. Заплатников А.Л., Захарова И.Н., Коровина Н.А. Clostridium difficile-инфекция у детей. «РМЖ» №5 от 06.03.2004 стр.373. https://www.rmj.ru/articles/pediatriya/Clostridium_difficile-infekciya_u_detey/ 
9. LabTests Online. AACC. Clostridium difficile and C. diff Toxin Testing. https://labtestsonline.org/