Исследуемый материал
костный мозг
Метод определения
Цитогенетический анализ.
Цитогенетическое исследование клеток костного мозга (кариотипирование) – это микроскопический анализ хромосом, который проводится для определения кариотипа, выявления численных и структурных нарушений в структуре хромосом, а также подтверждения онкологического заболевания.
Результаты цитогенетического исследования очень важны для постановки диагноза, классификации, лечения и научного исследования заболеваний системы крови, прежде всего-онкогематологических (лейкозов, миелодиспластических синдромов и хронических миелопролиферативных заболеваний).
Клетки костного мозга культивируют в специально приготовленной питательной среде в течение суток (24 часа), затем фиксируют полученный материал на предметном стекле дифференциально окрашивают по Гимзе (G-banding) и анализируют с использованием микроскопа и компьютерной системы видеоанализа.
Анализ хромосом под микроскопом производится на стадии метафазы, когда хромосомы максимально видны и располагаются в центре клетки. Нормальные клетки содержат 22 пары аутосом и одну пару половых хромосом: две Х-хромосомы у женщин и по одной копии половых хромосом (X и Y) - у мужчин.
В каждом отдельном случае анализируется 20 метафазных пластин.
На сегодняшний день насчитывают несколько наиболее часто встречающихся видов хромосомных нарушений: количественные нарушения – моносомии (наличие только одной хромосом из пары), трисомии-добавление одной или нескольких хромосом.
Качественные нарушения (так называемые аберрации или поломки хромосом): делеция –удаление участка хромосомы, транслокация – перенос участков генома с одной хромосомы на другую, дупликация-дублирование определенного участка хромосомного плеча, инверсия-поворот участка хромосомы на 180 градусов.
Клиническое значение: клетка, которая имеет приобретенную или врожденную аномалию, может стать предшественницей целого клона клеток, формирующих опухоль. Своевременное обнаружение таких клеток способствует ранней постановке диагноза и назначению правильной дальнейшей тактики лечения.
Присутствие специфических хромосомный аномалий помогает выделить группы пациентов, которым требуется назначение специфической терапии. Например, обнаружение транслокаций t(15;17) подтверждает диагноз острого промиелоцитарного лейкоза (ОМЛ-М3), в комплексном лечении которого требуется ретиноевая кислота.
Результаты цитогенетического исследования имеют значение не только для постановки диагноза, но и для определения прогноза заболевания. Так, например, обнаружение множественных хромосомных аномалий у больных острыми лейкозами является прогностически неблагоприятным фактором и может служить основанием для выполнения трансплантации костного мозга.
Цитогенетический анализ у пациентов после проведенного лечения помогает контролировать степень элиминации патологического клона и, соответственно, оценить полноту ремиссии.
Литература
- Абдулкадыров К.М. Клиническая гематология. Справочник-СПБ: Питер,2006.-С.448.
- Д. Гарифуллин, С.В. Волошин, И.С. Мартынкевич и др. Генетические аномалии: влияние на эффективность терапии, выживаемость больных множественной миеломой, роль в оценке минимальной остаточной болезни / Медицинская генетика. – 2016. – Т. 15, №9. – С. 29-39.
- Araber D.A.,Orazi A.,Hasserjian R. The 2016 revision to the World Health Organization classification of myeloid neoplasms and acute leukemia. Blood 2016;127(10):2391-2405.
