№4192, Фенотипирование лимфоцитов (основные субпопуляции) - CD3, CD4, CD8, CD19, CD16,56

Синонимы: Иммунофенотипирование; Клеточный иммунитет; Субпопуляции лимфоцитов. 

Immunophenotyping; Human Leukocyte Differentiation Antigens; Lymphocyte subsets.

В профиль входят следующие исследования:

• лимфоциты, абсолютное значение 
• Т-лимфоциты (CD3+) 
• Т-хелперы (CD3+CD4+) 
• Т-цитотоксические лимфоциты (CD3+CD8+) 
• Отношение CD4/CD8 
• В-лимфоциты (СВ19+) 
• ЕК-клетки (CD3-CD16+CD56+) 
• Т-ЕК-клетки (CD3+CD16+CD56+)

Краткое описание исследования «Фенотипирование лимфоцитов (основные субпопуляции) – CD3, CD4, CD8, CD19, CD16, 56»

Лимфоциты составляют 20-40% от всего числа лейкоцитов, относятся к агранулоцитам (не содержат гранул в цитоплазме), представлены гетерогенными субпопуляциями клеток, которые не отличаются по морфологии, но несут на поверхности разные специфические рецепторы (молекулы, называемые кластерами дифференцировки), и выполняют различные функции. 

В числе таких функций: распознавание различных антигенов благодаря экспрессии на поверхности клеток уникальных антигенных рецепторов, формирование гуморального иммунного ответа к чужеродным белкам путем синтеза антител (иммуноглобулинов различных классов), обеспечение клеточного иммунитета − уничтожение разных клеток непосредственно эффекторными цитотоксическими лимфоцитами (отторжение трансплантата, противоопухолевый иммунитет, иммунитет против внутриклеточных паразитов, в том числе противовирусный). Часть лимфоцитов является клетками памяти, которые сохраняют информацию о ранее встречавшемся антигене.

Кластеры дифференциации лимфоцитов

Лимфоциты экспрессируют ряд поверхностных и цитоплазматических антигенов, уникальных для своей субпопуляции и стадии развития. Эти структуры при иммунофенотипировании лимфоцитов являются антигенными маркерами различных субпопуляций лимфоцитов, присутствие которых определяют с помощью флуорохром-меченых моноклональных антител, что позволяет определить их количественное содержание с применением поточной цитофлюометрии. Поверхностные антигенные структуры на клетках, выявляемые моноклональными антителами, назвали кластерами дифференциации (CD, Clusters of Differentiation).

Кластерам дифференциации в целях стандартизации присвоены определенные номера. Используя флуорохром-меченые моноклональные антитела, связывающиеся с определенными CD, можно определить содержаниея лимфоцитов, относящихся к различным по функциям или стадии развития субпопуляциям. Это позволяет понять природу некоторых заболеваний, оценить состояние пациента, следить за течением заболевания и прогнозировать его дальнейшее развитие.

Характеристика основных субпопуляций лимфоцитов

Т-лимфоциты – лимфоциты, созревание которых происходит в тимусе (отсюда их название). Они происходят из клеток-предшественников костного мозга, которые мигрируют в тимус для созревания, селекции и последующего экспорта на периферию, участвуют в обеспечении клеточного иммунного ответа и контроле работы В-лимфоцитов, ответственных за образование антител (гуморальный иммунный ответ). Т-клетки координируют различные аспекты адаптивного иммунитета на протяжении всей жизни, включая реакцию на патогены, аллергены и опухоли.

Т-хелперы (от англ. to help – помогать) представляют собой разновидность Т-лимфоцитов и несут на своей поверхности структуры, способствующие распознаванию антигенов, презентированных вспомогательными клетками. Участвуют в регуляции иммунного ответа, вырабатывая различные цитокины.

Цитотоксические Т-клетки распознают фрагменты антигена на поверхности клеток-мишеней, ориентируют свои гранулы по направлению к мишени и высвобождают их содержимое в область контакта с ней. При этом некоторые цитокины являются сигналом гибели (по типу апоптоза) для клеток-мишеней.

В-лимфоциты (от лат. bursa – сумка, по названию сумки Фабрициуса, в которой созревают эти лимфоциты у птиц) проходят развитие в лимфоузлах и других периферических органах лимфоидной системы. На поверхности эти клетки несут иммуноглобулины, функционирующие как рецепторы к антигенам. В ответ на взаимодействие с антигеном В-лимфоциты делятся и дифференцируются в плазматические клетки, вырабатывающие антитела, посредством которых обеспечивается гуморальный иммунитет.

ЕК-клетки (естественные киллерные клетки, или натуральные киллеры) – клетки с естественной, неиммунной цитотоксической активностью к неопластически измененным клеткам-мишеням. ЕК-клетки не относятся ни к зрелым Т- или В-лимфоцитам, ни к моноцитам. EKT-клетки – это клетки с естественной неиммунной киллерной активностью, имеющие признаки Т-лимфоцитов.

При интерпретации результатов оценки содержания субпопуляций лимфоцитов важно обращать внимание на их абсолютное количество.

Специфические кластеры дифференциации антигенов

CD3 – поверхностный маркер, специфичный для всех клеток субпопуляции Т-лимфоцитов. CD3 является корецептором Т-клеточного рецептора (TCR), отвечающего за распознавание процессированных антигенов, связанных с молекулами главного комплекса гистосовместимости. CD3 необходим для экспрессии TRC на клеточной поверхности и обеспечивает передачу сигнала внутрь клетки. 

CD4 характерен для хелперных Т-клеток. Экспрессируется также на моноцитах, макрофагах, дендритных клетках. Он связывается с молекулами MHC класса II (Major Histocompatibility Complex; главный комплекс гистосовместимости 2 класса), которые находятся на антигенпрезентирующих клетках, облегчая распознавание пептидных антигенов.

CD8 характерен для супрессорных и/или цитотоксических Т-клеток, ЕК-клеток, большей части тимоцитов. Это рецептор Т-клеточной активации, который облегчает распознавание клеточно-связанных антигенов MHC класса I.

CD16 используется вместе с CD56 преимущественно для идентификации ЕК-клеток. Представлен также на макрофагах, тучных клетках, нейтрофилах, некоторых Т-клетках. Это компонент рецепторов, связанных с IgG, опосредующих фагоцитоз, продукцию цитокинов и антителозависимую клеточную цитотоксичность.

CD19 присутствует на B-клетках, их предшественниках, фолликулярных дендритных клетках, считается самым ранним маркером B-клеточной дифференциации. Регулирует развитие, дифференциацию и активацию B-клеток.

CD56 – прототипный маркер ЕК-клеток. Помимо ЕК-клеток, присутствует на эмбриональных, мышечных, нервных, эпителиальных клетках, некоторых активированных Т-клетках. CD56-позитивны такие гематологические опухоли, как ЕК-клеточная или Т-клеточная лимфома, анапластическая крупноклеточная лимфома, плазмоклеточная миелома (плазмоклеточная лейкемия CD56-негативна). Это молекулы адгезии клеточной поверхности, которые облегчают гомофильную адгезию и участвуют в контактном ингибировании роста, ЕК-клеточной цитотоксичности, развитии нервных клеток.

С какой целью выполняют Фенотипирование лимфоцитов (основные субпопуляции) – CD3, CD4, CD8, CD19, CD16, 56

Фенотипирование с количественным определением содержания основных субпопуляций лимфоцитов применяют в целях скрининговой оценки общего иммунного статуса, в том числе, в комплексных исследованиях при первичных иммунодефицитах, лимфопролиферативных заболеваниях (при которых характеристика лимфоидных клеток с точки зрения происхождения предоставляет врачу ценную информацию для прогноза и определения соответствующей терапии), ВИЧ-инфекции, аутоиммунных заболеваниях, а также для оценки изменений при иных видах патологии, которые могут стать причиной вторичных иммунодефицитов, и мониторинга состояния и контроля терапии пациентов с иммунодефицитными, аутоиммунными состояниями, пациентов после трансплантации органов и пр.

Литература

1. Зурочка А.В., Хайдуков С.В. и др. - Проточная цитометрия в медицине и биологии. – Екатеринбург: РИО УрО РАН, 2013. – 552 с. 
2. Клиническая иммунология и аллергология / Ред. Лолор-младший Г., Фишер Т, Д. Адельман Д../: Пер. с англ. - М.: Практика, 2000. - 806 с.
3. Клиническая лабораторная диагностика. Национальное руководство. Том 2./Ред. Долгов В.В., Меньшиков В.В./ – М., ГЭОТАР-Медиа, 2012 – 808 с. 
4. Практическое руководство по детским болезням. Том 8 Иммунология детского возраста. /Ред. А.Ю.Щербина, Е.Д.Пашанов/ - Москва: МЕДПРАКТИКА, 2006 - 432 с. 
5. Ройт А., Бростофф Д., Дейл Д. Иммунология. - М.: Мир, 2000 — 592 с 
6. Ярилин А. А. Иммунология. – М.: ГЭОТАР-Медиа. 2010 - 752 с. 
7. Leach М., Drummond М., Doig A. Practical Flow Cytometry in Haematology Diagnosis Hardcover. – WILEY-BLACKWELL, 2013. 
8. Tietz Clinical guide to laboratory tests. 4-th ed. Ed. Wu A.N.B. – USA: W.B Sounders Company, 2006 - 1798 p.

Литература

1. Зурочка А.В., Хайдуков С.В. и др. - Проточная цитометрия в медицине и биологии. – Екатеринбург: РИО УрО РАН, 2013. – 552 с. 
2. Клиническая иммунология и аллергология / Ред. Лолор-младший Г., Фишер Т, Д. Адельман Д../: Пер. с англ. - М.: Практика, 2000. - 806 с.
3. Клиническая лабораторная диагностика. Национальное руководство. Том 2./Ред. Долгов В.В., Меньшиков В.В./ – М., ГЭОТАР-Медиа, 2012 – 808 с. 
4. Практическое руководство по детским болезням. Том 8 Иммунология детского возраста. /Ред. А.Ю.Щербина, Е.Д.Пашанов/ - Москва: МЕДПРАКТИКА, 2006 - 432 с. 
5. Ройт А., Бростофф Д., Дейл Д. Иммунология. - М.: Мир, 2000 — 592 с 
6. Ярилин А. А. Иммунология. – М.: ГЭОТАР-Медиа. 2010 - 752 с. 
7. Leach М., Drummond М., Doig A. Practical Flow Cytometry in Haematology Diagnosis Hardcover. – WILEY-BLACKWELL, 2013. 
8. Tietz Clinical guide to laboratory tests. 4-th ed. Ed. Wu A.N.B. – USA: W.B Sounders Company, 2006 - 1798 p.

• Рецидивирующие инфекции, инфекционные заболевания с хроническим и затяжным течением.
• Подозрение на генетически обусловленный или приобретённый иммунодефицит.  
• Аутоиммунные заболевания. 
• Аллергические заболевания. 
• Онкологические заболевания.  
• Обследование реципиентов до и после трансплантации органов. 
• Обследование пациентов перед серьёзными оперативными вмешательствами.
• Осложнённое течение послеоперационного периода.
• Контроль терапии цитостатиками, иммунодепрессантами и иммуномодуляторами.

Литература

1. Зурочка А.В., Хайдуков С.В. и др. - Проточная цитометрия в медицине и биологии. – Екатеринбург: РИО УрО РАН, 2013. – 552 с. 
2. Клиническая иммунология и аллергология / Ред. Лолор-младший Г., Фишер Т, Д. Адельман Д../: Пер. с англ. - М.: Практика, 2000. - 806 с.
3. Клиническая лабораторная диагностика. Национальное руководство. Том 2./Ред. Долгов В.В., Меньшиков В.В./ – М., ГЭОТАР-Медиа, 2012 – 808 с. 
4. Практическое руководство по детским болезням. Том 8 Иммунология детского возраста. /Ред. А.Ю.Щербина, Е.Д.Пашанов/ - Москва: МЕДПРАКТИКА, 2006 - 432 с. 
5. Ройт А., Бростофф Д., Дейл Д. Иммунология. - М.: Мир, 2000 — 592 с 
6. Ярилин А. А. Иммунология. – М.: ГЭОТАР-Медиа. 2010 - 752 с. 
7. Leach М., Drummond М., Doig A. Practical Flow Cytometry in Haematology Diagnosis Hardcover. – WILEY-BLACKWELL, 2013. 
8. Tietz Clinical guide to laboratory tests. 4-th ed. Ed. Wu A.N.B. – USA: W.B Sounders Company, 2006 - 1798 p.

Интерпретация результатов исследования содержит информацию для лечащего врача и не является диагнозом. Информацию из этого раздела нельзя использовать для самодиагностики и самолечения. Точный диагноз ставит врач, используя как результаты данного обследования, так и нужную информацию из других источников: анамнеза, результатов других обследований и т.д.

Литература

1. Зурочка А.В., Хайдуков С.В. и др. - Проточная цитометрия в медицине и биологии. – Екатеринбург: РИО УрО РАН, 2013. – 552 с. 
2. Клиническая иммунология и аллергология / Ред. Лолор-младший Г., Фишер Т, Д. Адельман Д../: Пер. с англ. - М.: Практика, 2000. - 806 с.
3. Клиническая лабораторная диагностика. Национальное руководство. Том 2./Ред. Долгов В.В., Меньшиков В.В./ – М., ГЭОТАР-Медиа, 2012 – 808 с. 
4. Практическое руководство по детским болезням. Том 8 Иммунология детского возраста. /Ред. А.Ю.Щербина, Е.Д.Пашанов/ - Москва: МЕДПРАКТИКА, 2006 - 432 с. 
5. Ройт А., Бростофф Д., Дейл Д. Иммунология. - М.: Мир, 2000 — 592 с 
6. Ярилин А. А. Иммунология. – М.: ГЭОТАР-Медиа. 2010 - 752 с. 
7. Leach М., Drummond М., Doig A. Practical Flow Cytometry in Haematology Diagnosis Hardcover. – WILEY-BLACKWELL, 2013. 
8. Tietz Clinical guide to laboratory tests. 4-th ed. Ed. Wu A.N.B. – USA: W.B Sounders Company, 2006 - 1798 p.