Исследуемый материал
Архивные парафиновые блоки операционного и биопсийного материала, фиксированного в 10% забуференном нейтральном растворе формалина (образцы ткани первичной и метастатической опухоли).
Метод определения
Флуоресцентная in situ гибридизация (FISH).
Синонимы: FISH-исследование c использованием 1 флуоресцентного ДНК-зонда
Fluorescence in situ hybridization (FISH): FISH testing using 1 probe.
Краткое описание исследования «Флуоресцентная гибридизация in situ (FISH): FISH-исследование c использованием 1 флуоресцентного ДНК-зонда»
FISH (Fluorescence in situ Hybridization) – это современный молекулярно-цитогенетический метод, позволяющий выявить хромосомные перестройки непосредственно в клетках исследуемой ткани. Метод основан на гибридизации (связывании) флуоресцентно-меченных ДНК-зондов с комплементарными последовательностями ДНК в определенных участках хромосомного локуса. После связывания зонда с целевой (таргентной) последовательностью сигналы визуализируются с помощью флуоресцентной микроскопии, что позволяет определить наличие и тип генетических нарушений в клетках исследуемого образца.
В настоящее время в рутинной практике в зависимости от диагностических задач применяются разные типы зондов:
- Break-apart зонды, состоящие из двух флуоресцентных меток, фланкирующих ген. Используются для выявления транслокаций независимо от партнерского гена;
- Fusion зонды, меченные разными флуорохромами и направленные на два разных гена, что позволяет выявить химерные гены;
- СЕР (центромерные) зонды, связывающиеся с центромерным участком хромосомы, что позволяет провести оценку числа копий гена;
- LSI (локус-специфические) зонды, направленные на анализ конкретных генов. Используются для выявления амплификаций, делеций и других изменений.
FISH-исследование позволяет выявить следующие хромосомные реаранжировки:
- транслокации;
- делеции;
- дупликации;
- инверсии;
- амплификации.
Применение FISH-метода
FISH-метод получил широкое применение:
- в онкогематологии,
- в солидных опухолях (рак молочной железы, легкого и др.),
- в дифференциальной диагностике новообразований,
- в выборе таргентной терапии.
Метод обладает высокой точностью и воспроизводимостью, рассматривается как референсный (подтверждающий) метод исследования и является ключевым инструментом сопроводительной диагностики, позволяя определять молекулярные мишени для назначения современных противоопухолевых препаратов.
С какой целью выполняют исследование
Тест используют для уточнения диагноза, прогноза и выбора оптимальной тактики лечения.
Литература
- Иммуногистохимические методы: руководство / ed. by George L. Kumar, Lars Rudbeck: DAKO / пер. с англ., под ред. Г. А. Франка и П. Г. Малькова. – М., 2011. – 224 с.
- Флуоресцентная in situ гибридизация в практике научных и клинических цитогенетических исследований: учебно-методическое пособие / А. Ф. Сайфитдинова, И. Л. Пуппо. – Санкт-Петербург: РГПУ им. А. И. Герцена, 2021. – 60 с.
- Флуоресцентные методы исследования, гибридизация in situ: учебно-методическое пособие /Артемьева Е. С., Артемьева А. С., Кушнарев В. А., Рогачев М. В. – Санкт-Петербург: НМИЦ онкологии им. Н.Н. Петрова, 2021. – 88 с.